关于细胞培养攻略,你需要知道这些 | | 旗凯
细胞培养已经成为细胞和分子生物学研究的主要伎俩之一。目前在很多领域细胞培养正发挥着重要的作用。在进行以细胞为基础的试验和化验时,科研人员常常需要制造大量细胞以满足实验的需要。养细胞,已经成为了进实验室的必备技能之一。如果你至今都不会养细胞,那你就out了! 细胞培养的办法 细胞培养一般采用两种基本的培养办法,贴壁培养和悬浮培养。这两种办法主要的辨别在于细胞在玻璃或经处理的化工中间体(氟草烟甲酯)农药中间体基质上的附着能力以及培养基中的悬浮状况。 贴壁培养通常在经组织培养处理或CellBIND®处理的培养皿、T培养瓶、滚瓶、CellSTACK®培养室或多孔培养板上进行培养,选择何种培养器皿主要依据所需细胞的数量、培养环境的状态、费用和个人习惯而定。 悬浮培养通常在以下培养器皿中进行培养: 1、依靠磁力搅拌器转动的悬浮细胞培养瓶或锥形瓶,能够有效保持培养基中细胞的悬浮活性 2、静态培养瓶如T培养瓶(扁平式)和普通培养瓶,其中的悬浮细胞没有持续搅动,也不会稳定地附着在培养基质上。 细胞培养条件 细胞培养首先要求培养环境无毒无菌,因为体外的细胞丢失了对抗微生物的防御力,所以一旦污染就会导致细胞死亡。细胞培养必须维持在恒定且合适的温度。模仿体内环境嘛,那就是人体温多少,体外就模仿多少度,也就是36.5℃±0.5℃。一般来说,体外培养细胞所用的孵箱都是37℃恒温孵箱。 那为什么孵箱上还显示着5%二氧化碳呢?因为气体也是人体细胞培养生存的必须条件之一,主要就是氧气和二氧化碳。氧气参与三羧酸循环供应能量,二氧化碳用来维持培养基的PH值在7.2-7.4之间。再次,需要细胞培养基。培养基作为模仿体内环境所需的营养物质,一般包含碳水化合物,氨基酸,脂类,无机盐,维生素,微量元素和生长因子等。 细胞培养过程中的留神事项 进入培养间时,保持双手洁净。使用肥皂彻底清洗后,酒精干燥(不用纸巾) •佩戴手套(保证手套能够被消毒) •穿着带有松紧袖口的实验服 •不要随便触碰无关物品(例如:电话、门把手、甚至说是整理头发等) •避免佩戴手表、戒指和其他首饰 •脱去在其他地方接触过动物的衣服 •患有感冒的人员需佩戴面罩